基因工程畢業論文開題報告

時間：2024-10-06 13:16:03 開題報告我要投稿

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基因工程畢業論文開題報告

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基因工程畢業論文開題報告

　　論文(設計)題目：農桿菌介導的西瓜NPR1基因遺傳轉化

　　選題的意義：

　　西瓜為葫蘆科植物，是夏季重要水果。近年來，西瓜生產中病毒感染嚴重，影響產量和品質。化學農藥防治存在農藥殘留問題，所造成的環境問題日益嚴重突出。因此選用生物工程技術選育抗病毒的良種已經成為當務之急，植物基因工程為抗病育種提供了新途徑。

　　研究的主要內容：

　　1、查閱收集文獻資料，熟悉相關研究內容。

　　2、制訂出研究方案、實驗方法。

　　3、對西瓜種子進行浸染、共培養的時間的測定；

　　4、開展不定牙分化、不定根生根的轉化率的測量；

　　5、試驗在分化過程中不同激素濃度對分化過程的影響，并確定最佳濃度；

　　6、試驗在分化過程中不同Hy篩選濃度對分化過程的影響，并確定其最佳濃度；

　　7、對實驗數據、結果做出分析、總結。

　　研究綜述(前人的研究現狀及進展情況)：

　　1992年Serrano等用農桿菌介導法將hlaI基因轉入西瓜，轉化的西瓜在離體狀態下對Nacl產生較高抗性。

　　1991—1997年黃學森、彭學賢、萬莉、王慧中等，將WMV的外殼蛋白基因導入西瓜植株，獲得抗性材料，并獲農業部批準進行安全釋放試驗。

　　1997年肖光輝等采用DNA浸胚法，將外源瓜DNA導入西瓜，變異株的生長勢明顯增強，而對照西瓜葉部病害較重。

　　1998年Chen-ShawChen等通過花粉管途徑將抗鐮刀枯萎并基因導入西瓜轉化植株表現出枯萎的抗性。

　　1998年到2003年，中國農業大學生物技術國家實驗室、新加坡國立大學、山西金鼎種業公司合作，將WMVCP基因、ZYMV復制酶基因、CMV復制酶基因通過農桿菌介導，成功導入西瓜植株，經溫室及大田抗病毒鑒定表明：其抗性達到中抗以上水平。

　　但尚未見有關農桿菌介導法將NPR1基因轉入西瓜的報道。

　　擬采用的研究方法、步驟：

　　一、方法：農桿菌介導法

　　二、步驟：

　　1、外植體(西瓜子葉)的獲得；

　　2、農桿菌菌葉浸染子夜，置MS+6—BA1.0mg/L培養基、暗箱共培養2—3天；

　　3、無菌水清洗4次后，無菌紙吸干，置MS+6—BA1.0mg/L+Cef100mg/L+Hy培養基上誘導叢生牙的分化；

　　4、轉化牙轉入MS+6—BA+IBA+Cef+Hy培養基中成苗；

　　5、轉2.0CM高的苗于MS+6—BA+IBA+NAA1.0mg/L+Cef+Hy培養基中生根；

　　6、將已生根的無菌苗移致花盆中，一個月后轉入大田；

　　7、PCR檢測。

　　研究工作進度安排：

　　20XX年12月份誘導子葉叢生牙的分化；

　　20XX年1月到2月成苗、生根；基本掌握PCR檢測技術；

　　20XX年3月到4月移栽、DNA提取、PCR檢測、統計和分析實驗數據，完成畢業論文初稿；

　　20XX年5月份畢業論文定稿。

　　參考文獻目錄：

　　[1]農桿菌轉化獲得轉基因西瓜植株，浙江大學學報，2000年；

　　[2]葫蘆科作物轉基因研究進展，細胞生物學雜志，2002年；

　　[3]西瓜轉基因抗病毒病新材料BH—1，2004年。

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